人(Human)ELISA豪运国际 豪运国际:小鼠(Mouse)ELISA豪运国际
人(Human)补体因子Bb(CBb)ELISA检测豪运国际产品货号:DM-H494产品规格:[48/96T]ELISA检测豪运国际的原理酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是一种将抗原 - 抗体特异性免疫反应与酶催化底物的化学显色反应相结合的高灵敏度、高特异性免疫分析技术。它通过将不可见的免疫反应转化为可定量的显色信号,实现对样本中极微量目标物质(如蛋白质、激素、抗体、病原体抗原等)的定性或定量检测。核心原理ELISA 的核心原理基于三个关键环节,所有类型的 ELISA 都遵循这一基本逻辑:固相包被:将已知的抗原或抗体通过物理吸附的方式牢固固定于固相载体(通常为聚苯乙烯 96 孔微孔板)表面,并保持其免疫活性。特异性结合与酶标记:利用抗原与抗体之间 "锁钥式" 的高度特异性识别与结合能力,使样本中的目标分析物与固相上的对应配体发生反应。同时,将酶(*常用的是辣根过氧化物酶 HRP 和碱性磷酸酶 AP)标记在抗体或抗原上,形成酶标结合物。该结合物既能与相应的抗体或抗原发生免疫反应,又保留酶的催化活性。显色与定量:在反应体系中,结合在固相上的酶量与样本中待测物含量成比例。加入酶特异性底物后,底物被酶催化生成有色产物。通过酶标仪测定吸光度(OD 值),即可根据颜色深浅判断待测物的浓度。酶的高效催化作用可极大放大信号,使该方法具备极高的检测灵敏度,可检测 ng 甚至 pg 级别的微量物质。主要类型及原理对比根据实验设计和检测对象的不同,ELISA 主要分为以下四种类型:1. 直接法 ELISA原理:将抗原直接包被在固相载体上,加入酶标记的特异性一抗进行孵育,结合后酶催化底物反应显色。吸光度值与抗原浓度呈正相关。优点:操作步骤少,耗时短,避免了二抗可能引起的交叉反应。缺点:信号无放大作用导致灵敏度较低;每种待测物均需制备特异性酶标抗体,灵活性差;易因非特异性吸附导致背景较高。应用场景:病原体快速定性检测、纯化蛋白定量、抗体筛选和抗原表位作图。2. 间接法 ELISA原理:将抗原固定于固相载体,先加入非酶标一抗与抗原结合,再加入酶标二抗(针对一抗的抗体)进行检测。吸光度值与一抗浓度呈正相关。优点:通过二抗放大信号,灵敏度显著高于直接法;一种酶标二抗可适用于多种同种属来源的一抗,经济且灵活。缺点:实验步骤增多,周期延长;二抗可能与固相抗原发生非特异性结合,潜在交叉反应风险。应用场景:主要用于检测样本中的抗体,如病原体特异性 IgG/IgM、自身免疫病抗体滴定、过敏诊断等。3. 双抗体夹心法 ELISA原理:使用两种分别针对目标抗原不同表位的抗体。一种作为 "捕获抗体" 包被固相,加入样本后抗原被捕获;再加入另一种 "检测抗体"(可直接酶标记或通过酶标二抗间接检测),形成 "捕获抗体 - 抗原 - 检测抗体" 的三明治复合物。吸光度值与抗原浓度呈正相关。优点:适用于多表位抗原检测,具有极高的特异性和灵敏度(可达 pg/mL 级),是应用*广泛的 ELISA 形式。缺点:要求两种抗体不存在交叉反应,且不竞争同一结合位点,对抗体配对要求高。应用场景:细胞因子检测(如 IL-6、TNF-α)、肿瘤标志物筛查(如 CEA、PSA)、激素水平测定、食品安全中蛋白质含量检测等。4. 竞争法 ELISA原理:将捕获抗体包被在固相载体上,同时加入样本中的目标抗原和酶标抗原,两者竞争结合有限的抗体结合位点。当样本中目标抗原浓度升高时,其与捕获抗体的结合会挤占酶标抗原的结合空间,*终催化底物产生的显色信号强度与目标抗原含量呈负相关。优点:可检测缺乏多表位的小分子物质(如激素、药物代谢物、农药残留)或半抗原;竞争模型天然规避复杂样本中高丰度蛋白的干扰。缺点:灵敏度相对较低;抗原结构类似物易引发假阴性 / 阳性信号;反向标曲增加数据分析复杂度。应用场景:小分子激素检测、药物血药浓度监测、农药残留分析、生物毒素筛查等。基本实验步骤以*常用的双抗体夹心法为例,ELISA 实验的基本流程如下:包被:将捕获抗体用包被缓冲液稀释至合适浓度,每孔加入 100μL,4℃孵育过夜或 37℃孵育 2 小时。封闭:弃去孔内液体,洗涤后每孔加入 200μL 封闭液(如 1% BSA),37℃孵育 1 小时,阻断未结合包被物的空白位点。加样:加入稀释后的样本和一系列浓度梯度的标准品,每孔 100μL,37℃孵育 1-2 小时。加检测抗体:洗涤后加入酶标检测抗体,37℃孵育 1 小时。显色:洗涤后每孔加入底物 A、B 液各 50μL,37℃避光显色 15-20 分钟。终止反应:每孔加入 50μL 终止液(如 2mol/L H₂SO₄),此时颜色不再变化。读数与分析:在终止反应后 15 分钟内,用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔吸光度值,根据标准品绘制标准曲线,计算待测样本浓度。技术优势与应用领域主要优势高灵敏度:酶的催化作用放大了免疫反应信号,可检测 pg 级别的微量物质强特异性:基于抗原抗体的高度特异性结合,交叉反应率低操作简便:流程标准化,易于掌握,适合批量检测成本相对较低:相比质谱等高端技术更经济实用可定量分析:通过标准曲线实现精确的定量检测广泛应用ELISA 技术凭借其优异的性能,已成为生物医学研究和临床诊断中不可或缺的工具,广泛应用于:临床医学诊断:感染性疾病病原体抗原 / 抗体检测、肿瘤标志物定量、激素水平测定、治疗药物监测等基础研究:细胞因子分泌水平分析、蛋白质表达定量、疫苗效价评估等食品安全监测:农药残留分析、生物毒素筛查、抗生素残留检测等畜牧兽医与动物检疫:动物疫病诊断、畜禽产品兽药残留检测等环境监测:环境污染物检测、水质分析等样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。生化豪运国际与ELISA豪运国际的核心区别ELISA豪运国际免费代测服务详解上海笃玛生物免费代测服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 为购买其 DUMABIO 品牌 ELISA 豪运国际的客户提供免费代测服务,这是该公司的核心增值服务之一。服务内容1.支持双抗体夹心法检测抗原、间接法检测抗体等多种 ELISA 技术2.可检测血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液、胸腹水、脑脊液等多种标本类型服务周期1.一般在收到样本后的7 个工作日内出具实验报告2.特殊情况可协商加急服务交付结果1.原始 OD 值数据2.标准曲线及拟合方程3.样本浓度计算结果4.完整的实验报告5.免费代测基本条件6.样本质量要求:样本必须新鲜或正确保存,无明显溶血、脂血或污染7.样本要求与处理8.样本体积9.每个检测孔至少需要100μL样本体积10.建议按 "检测孔数 ×120μL" 准备,预留一定余量11.如需做复孔检测,样本量需加倍保存与运输1.样本处理后应分装密封保存,避免反复冻融2.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。3.有效期:6个月4.邮寄时必须使用干冰运输,确保样本在运输过程中保持冷冻状态标记要求在样本管盖或管壁清晰标记样本编号管口用封口膜封好,防止污染和泄漏随样本提供详细的代测信息表,包括:标本编号、所测项目、是否做复孔、实验后标本是否寄回代测服务流程咨询与订购:联系客服确认所需检测指标,订购对应 ELISA 豪运国际样本准备:按照要求收集、处理和保存样本样本寄送:将样本和代测信息表一起寄送至公司实验室实验检测:专业技术人员按照标准 SOP 流程进行实验操作数据分析:对实验数据进行整理和分析,生成标准曲线和样本浓度报告交付:通过邮件或在线方式发送完整的实验报告技术支持:提供后续的数据解读和实验咨询服务注意事项传染性样本:为保证实验室人员安全,不接受具有传染性疾病的样本样本责任:客户需对所提供样本的真实性和合法性负责实验失败处理:如因豪运国际质量问题导致实验失败,公司将免费重新检测;如因样本质量问题导致实验失败,需重新提供样本并可能收取相应费用数据保密:公司对客户的实验数据和样本信息严格保密免责声明1. 豪运国际仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
小鼠(Mouse)卵清蛋白特异性IgG2a(OVA-sIgG2a)ELISA检测豪运国际货号:DM-K442规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
小鼠(Mouse)卵清蛋白特异性IgG(OVA-IgG)ELISA检测豪运国际货号:DM-K436规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
小鼠(Mouse)卵清蛋白特异性IgA(OVA-sIgA)ELISA检测豪运国际货号:DM-K435规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
小鼠(Mouse)粘蛋白5AC(MUC5AC)ELISA检测豪运国际货号:DM-K428规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
小鼠(Mouse)卵白蛋白(OVA)ELISA检测豪运国际货号:DM-K426规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
小鼠(Mouse)卵清蛋白特异性IgG(OVA-sIgG)ELISA检测豪运国际货号:DM-K423规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
大鼠(Rat)基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA检测豪运国际货号:DM-F284规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
大鼠(Rat)仙台病毒抗体ELISA检测豪运国际货号:DM-F283规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
人(Human)端粒相关蛋白 (RIF1)ELISA检测豪运国际货号:DM-H490规格:96T/48T一、产品概述豪运国际-追求健康,你我一起成长 是专注于生命科学领域的高科技企业,秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,致力于为全球科研工作者提供高质量的生物学试剂及解决方案。本豪运国际是公司核心产品线之一,采用自主研发的高特异性抗体对,基于经典的双抗体夹心法原理构建,可**定量检测样本中的含量。二、检测原理本豪运国际采用双抗体夹心ELISA技术:将特异性捕获抗体预包被于酶标板微孔内;实验时,向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的检测指标会与包被抗体特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白后,加入生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-目标抗原-检测抗体”的免疫复合物;随后加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP),生物素与链霉亲和素发生特异性结合,使HRP牢固结合于免疫复合物上;*后加入TMB显色底物,HRP催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中检测指标的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值,结合标准曲线即可计算出待测样本的浓度。三、豪运国际的组分本豪运国际包含完成一次ELISA检测所需的全部核心组分,各组分经严格质检,确保实验可靠性,具体如下:四、样本处理1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。五、实验步骤1. 试剂准备:实验前将所有豪运国际组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,*终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。六、结果计算1. 首先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。七、豪运国际性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:*低检测浓度如说明书所示。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月八、储存与运输1. 豪运国际未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。2. 豪运国际开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。九、注意事项实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。本豪运国际仅用于科研用途,不用于临床诊断。十、售后服务豪运国际-追求健康,你我一起成长 拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系豪运国际 的技术顾问,豪运国际 将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
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